El curso de PCR a tiempo real recorre las diferentes aplicaciones de esta técnica y sus usos en los diferentes campos de la biotecnología. Así como las bases y fundamentos de esta técnica y los requerimientos y trucos para la obtención de resultados óptimos.
Tras una introducción a la base de la PCR y la fluorescencia, aprendemos la cuantificación absoluta por PCR a tiempo real, la cuantificación relativa, con especial enfoque a la expresión diferencial de genes y, por último, el genotipado; analizando las opciones de químicas disponibles para su análisis como sondas TaqMan® o SYBR Green®.
En todos los módulos tienes tutoriales detallados tanto del diseño experimental como del análisis de resultados y, también en todos ellos vas a diseñar tu propio experimento y analizar los resultados en ejercicios in silico reales. Realizamos todos los pasos en la ejecución de diversos experimentos de PCR a tiempo real con la única excepción del manejo de los reactivos para el montaje de las placas en el laboratorio.
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Presentación
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Introducción
Introducción
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Cuantificación absoluta
Absoluta
- T-301. Qué es la cuantificación absoluta
- T-302. Bases de la cuantificación por PCR a tiempo real
- T-303. Diseño del experimento. Resultados e interpretación
- T-304. La PCR digital
- C-301. Cuestionario
- M-301. Tutorial: instrucciones
- M-302. Tutorial: diseño de plantilla
- M-303. Tutorial: montaje de placa
- M-304. Tutorial: análisis de resultados
- M-305. Manual: resultados en excel
- M-306. Manual: interpretación de resultados
- I-301. In silico: instrucciones
- I-302. In silico: planteamiento
- I-303. In silico: cuestionario inicial
- I-304. In silico: diseño de la plantilla
- I-305. In silico: cuestionario de resultados
- I-306. In silico: tabla final de resultados
- I-307. In silico: pregunta final
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Cuantificación relativa
Relativa
- T-401. Qué es la cuantificación relativa
- T-402. Métodos de análisis de la expresión génica mediante PCR a tiempo real
- T-403. Validación: especificidad y eficiencia
- T-404. ΔΔCt: Diseño experimental. Resultados e interpretación.
- C-401. Cuestionario
- M-402. Tutoriales: Validación de primers. Especificidad.
- M-403. Tutoriales: Validación de primers. Eficiencia.
- M-404. Tutorial: diseño de plantilla
- M-405. Tutorial: análisis de resultados
- M-406. Manual: resultados en excel
- M-407. Manual: interpretación de resultados
- I-401. In silico: planteamiento
- I-402. In silico: cuestionario inicial
- I-403. In silico: diseño de la plantilla
- I-404. In silico: cuestionario de resultados
- I-405. In silico: tabla de resultados
- I-406. In silico: cuestionario de resultados
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Genotipado
Genotipado
- T-501. Genotipado: herencia y polimorfismos
- T-502. Genotipado con sondas fluorescentes
- T-503. Genotipado por HRM (High Resolution Melting)
- T-504. Diseño del experimento. Resultados e interpretación
- C-501. Cuestionario
- M-501 Tutorial: diseño de plantilla
- M-502. Tutorial: análisis de resultados
- M-503. Manual: resultados en excel
- M-504. Manual: interpretación de resultados
- I-501. In silico: planteamiento
- I-502. In silico: cuestionario inicial
- I-503. In silico: diseño de plantilla
- I-504. In silico: cuestionario de resultados
- I-505. In silico: tabla final
- I-506. In silico: cuestionario de interpretación
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Final
Final